Экстракт чая Уджи

UJI TEA EXTRACT (B) BG

INCI: CAMELLIA SINENSIS LEAF EXTRACT , BUTYLENE GLYCOL, WATER

Новая концепция предупреждения старения: ингибирование калпаина с целью блокирования чрезвычайно опасной “поздней стадии” окислительного стресса в клетках кожи.

Хорошо известно, что в результате УФ - облучения образуются реактивные формы кислорода (РФК), которые вызывают различные повреждения в клетках кожи. Доказано, что после УФ-облучения повышается активность матричных металлопротеиназ (ММП-1), разрушающих существующий коллаген, и уменьшается синтез нового коллагена, в результате окисления происходит нарушение нативной конформации белков. Процессы, связанные с действием РФК и именуемые "окислительным стрессом", могут приводить к необратимым клеточным изменениям, воспалению, образованию морщин и, как следствие, старению кожи.


Новейшие исследования японских ученых показали, что окисление в человеческих клетках кожи, спровоцированное УФ - облучением, протекает в два этапа. Первая фаза продукции реактивных форм кислорода (РФК) наблюдается в течение 1ч после УФ - экспозиции, и это – основная волна окислительного стресса, для коррекции которой используется большинство известных антиоксидантов.
Тем не менее, через 7ч после облучения в клетках наблюдался второй всплеск продукции РФК, предопределяя вторую, «позднюю фазу», оксидативного стресса (Рис.1). Исследования подтвердили, что «поздняя фаза» окислительного стресса наносит серьезный вред клеткам кожи и приводит со временем к таким кожным проблемам, как воспаление, пигментация и морщины.

Динамика продукции реактивных форм кислорода во времени после УФБ облучения.

УФБ - облученные клетки помещали на 30 мин. с 20 μM H2DCFDA (реактивом для определения активных форм кислорода в клетке, который при окислении превращается в интенсивно флуоресцирующее вещество) и каждый раз инкубировали в течение 30 мин. РФК в клетке измеряли по интенсивности флуоресценции (Ex: 485 нм/Em: 530 нм) клеточных лизатов. Статистическая значимость*<0.05.


рис.1 Динамика продукции реактивных форм кислорода во времени после УФБ облучения

Ученые выяснили, что вторая волна продукции реактивных форм кислорода связана с интерлейкином-1 альфа (ИЛ-1α)- воспалительным цитокином, обеспечивающим мобилизацию воспалительного ответа.(рис.2,3)

Зависимость секреции ИЛ-1α от времени после УФБ облучения

Клетки подвергли УФБ - облучению (25 мДж/см2). Секретированное в культуральную среду количество IL-1α определяли при помощи иммуносорбентного ферментного анализа (ELISA assay), набора реагентов «Quantikine Human IL-1α Immunoassay». Статистическая значимость*<0.05, **<0.01.

Рис.2 Зависимость секреции ИЛ-1α от времени после УФБ облучения


Рис.3 Образование реактивных форм кислорода как следствие продукции IL-1α

Клетки поместили с 20 μM H2DCFDA на 30 мин, после чего инкубировали в течение 30 мин. с 10 нг/мл IL-1α. Реактивные формы кислорода в клетке определяли по интенсивности флуоресценции(Ex: 485 нм/Em: 530 нм) клеточных лизатов. Статистическая значимость*<0.05, **<0.01.


Далее было установлено, что синтез IL-1α, за которым следовала генерация РФК, индуцировался калпаином. Калпаин - это цистеиновая протеаза, фермент, действующий в клетках в качестве регулятора и активируемый ионами кальция. Он обнаруживается во многих частях организма. О роли калпаина в процессе старения уже опубликовано несколько медицинских докладов. Исследования показали, что после УФБ - облучения клеток активность калпаина возрастает (Рис. 4)

Рис.4 Повышение активности калпаина после УФБ – облучения

Облученные (25 мДж/см2) клетки, помещенные с 10 μM субстрата Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC, специфичного к калпаину, каждый раз в течение 1ч (1, 2, 3, 4 и 6 ч) лизировали и определяли выраженность флуоресценции (Ex: 380 нм/Em: 460нм). *<0.05, **<0.01

Калпаин напрямую связан с «поздней стадией» окислительного стресса в клетках кожи. При нормальном состоянии клетки он неактивен. Повышение внутриклеточной концентрации свободного Са2+ выше пороговой величины приводит к активации калпаина. Калпаин экспрессируется примерно через 2-3 часа после УФ-облучения и запускает секрецию IL-1α, заканчивающуюся приблизительно через 7ч после первичной УФ-экспозиции. За секрецией IL-1α немедленно следует вторая волна продукции реактивных форм кислорода (Рис.5,6)

Рис.5 Двухфазный процесс образования реактивных форм кислорода после УФБ - облучения

Рис.6 Калпаин: активация секреции IL-1α


Рис.7 Участие Ca2+ в цепочке процессов, запускающих продукцию реактивных форм кислорода


В лабораторных условиях активность калпаина блокировалась ингибитором протеаз - ALLN (N-Acetyl-L-leucyl-L-leucyl-L-norleucinal). После предварительной обработки клеток этим реагентом в течение 1ч, клетки подвергли УФБ-облучению (25 мдж/см2). Активацию протеазы определяли через 2ч после УФ-экспозиции. Уровень выживаемости клеток оценивали по введенному красителю нейтральному красному. Продукцию реактивных форм кислорода измеряли через 7ч после УФБ - облучения (Рис. 7). Статистическая значимость; *<0.05, **<0.01.

Рис.8 Воздействие ингибитора калпаина (ALLN) на УФБ - индуцированные реакции


Краткое резюме-1
  • Поздняя фаза оксидативного стресса вызывает повреждения в УФБ - облученных
    клетках
  • Через 5ч после УФБ - экспозиции клетки начинают секретировать IL-1α
  • IL-1α стимулирует продукцию реактивных форм кислорода
  • УФБ - облучение индуцирует быструю активацию калпаина
  • Ингибитор калпаина снижает продукцию реактивных форм кислорода, запущенную
    УФБ - облучением

Эти исследования убедительно доказывают участие калпаин – IL-1α – каскада в генерации реактивных форм кислорода в облученных кератиноцитах во время второй стадии окислительного стресса.
После теоретических исследований, задачей которых было изучить механизмы, лежащие в основе двухфазного протекания окислительного стресса в клетках кожи после УФБ - облучения, перед учеными была поставлена задача идентифицировать натуральный ингредиент, который способен блокировать выявленные биохимические процессы, неизбежно ведущие к фотостарению.
С этой целью ученые провели скрининг множества растительных экстрактов на предмет ингибирования активности калпаина.

Скрининг веществ растительного происхождения на предмет ингибирования калпаина

IC50 является количественным индикатором, который показывает, сколько нужно лиганда—ингибитора для ингибирования биологического процесса на 50 %.

Ботаническое название IC50 value (μg/mL)
UJI TEA EXTRACT 13.8
Ocimum sanctum (святой базилик) >100
Grifola frondosa (грифола) >100
Acanthopanax senticosus (акантопанакс) 61.92

Резюме-2
  • Предыдущее исследование определило, что ранее неизвестная каскадная реакция с вовлечением калпаин-IL-1α непосредственно связана с продукцией реактивных форм кислорода в УФБ-облученных кератиноцитах.
  • Чтобы блокировать этот каскад, было протестировано множество растительных ингредиентов, способных ингибировать калпаин.
  • В качестве эффективного ингредиента, способного подавлять активность калпаина,
    был обнаружен Uji Tea extract. Исследования подтвердили, что этот экстракт способен
    защитить клетки от повреждений, вызванных калпаин-IL-1α каскадом, инициированным
    УФБ- облучением.
In vivo тест 1: уменьшение воспаления, индуцированного УФ – облучением

На кожу предплечья восьми испытуемым наносили тестируемые средства (в виде крема), содержавшие в составе UJI TEA EXTRACT (B)-BG в концентрации 1%, 2% и 3% и плацебо (таблица ниже)

Рецептура Плацебо 1% 2% 3%
Ингредиенты Wt% Wt% Wt% Wt%
А Phenoxyethanol 0.40 0.40 0.40 0.40
Вода 89.00 83.00 82.00 81.00
B Carbomer 0.30 0.30 0.30 0.30
C Arginine 0.30 0.30 0.30 0.30
Вода 10.00 10.00 10.00 10.00
D UJI TEA EXTRACT(B)-BG 1.00 2.00 3.00
E Вода 5.00 5.00 5.00
Всего 100.00 100.00 100.00 100.00

После аппликации крема соответствующие участки кожи облучали дозой в 1.5 МЭД (УФА+УФБ), используя симулятор УФ-излучения солнца Multiport Solar UV Simulator Model 601.
Сразу же после облучения тестируемые крема нанесли повторно и через 24 ч после УФ - экспозиции оценили уровень покраснения (Рис.10)

Рис. 10 Результаты In vivo теста : уменьшение очага воспаления, индуцированного УФ- облучением.

In vivo тест 2: уменьшение соотношения IL-1Ra/IL-1α в корнеоцитах
Тестируемый материал: UJI TEA EXTRACT (B)-BG
Концентрация: Плацебо, 1%, 2% и 3%
Участники: 7 человек

Метод: на кожу предплечья испытуемых апплицировали тестируемые средства (в виде крема), после чего облучили дозой в 1.5 МЭД (УФА+УФБ), используя симулятор УФ-излучения солнца Multiport Solar UV Simulator Model 601.
Сразу же после облучения тестируемые крема нанесли на эти участки кожи повторно. После этого теста крема наносились дважды в день в течение 4 недель. Через 4 недели со всех участков делали соскоб корнеоцитов клейкой лентой и определяли соотношение IL-1Ra/IL-1α, отражающее активность и тяжесть патологического процесса (Рис.11)

Рис. 11 Уменьшение показателя IL-1Ra/IL-1α в корнеоцитах
*IL-1Ra/IL-1α –это соотношение продукции интерлейкина-1α (IL-1α) и интерлейкин - 1-рецепторного антогониста (IL-1Ra).

Эффект от применения Uji Tea Extract (B)-BG
  • Uji Tea Extract (B)-BG ингибирует экспрессию калпаина
  • Подавляет развитие повреждений в клетке и уменьшает эритему, индуцированную
    УФБ- облучением через блокирование калпаин-ИЛ-1α каскада реакций
  • Уменьшает соотношение интерлейкин-1α (IL-1α)/ интерлейкин - 1-рецепторный
    антогонист (IL-1Ra) в клетках рогового слоя

Получение UJI TEA EXTRACT и сфера его применения в косметических средствах

UJI TEA EXTRACT получен из листьев растения Camellia sinensis (семейство Theaceae), которое служит сырьем для производства чая. По чайной классификации чай Uji (Уджи) относится к неферментированным, т.е. зеленым. Чайные листья для производства этого чая культивируются только в четырех префектурах Японии: Киото, Нара, Сига и Миэ и обрабатываются в Киото вручную традиционным способом (рисунок ниже).


Свыше 800 лет чай Уджи считался «напитком знати» и в настоящее время относится к классу премиальных чаев.
Его приобретают в качестве праздничного подарка или сувенира из областей Киото.

На основе полученных данных, подтверждающих ингибирование опасной поздней стадии окислительного стресса, вызванного УФ-облучением, экстрактом чая UJI, а также клинических испытаний, подтвердивших реальное уменьшение воспаления, представляется весьма перспективным исползование UJI TEA EXTRACT (B)-BG в различных косметических средствах для защиты и ухода за кожей лица и тела.

  • В антивозрастных средствах, в которых использование uji tea extract призвано замедлить процессы фотостарения кожи, а также выступить эффективным антивоспалительным агентом
  • В защитной косметике для загара, где uji tea extract способен замедлить или блокировать негативные реакции, спровоцированные пребыванием на солнце
  • Учитывая, что uji tea extract уменьшает эритему, индуцированную уф - лучами, он успешно может применяться в средствах по уходу за кожей после загара для снятия воспаления
Продукты на этой странице:
Перейти в каталог
Читайте также:
Описание продукции
Роза органик гидролат
Гидролат розы/Дистиллят розы/Розовая вода INCI: Rosa Damascena Flower Water Качество: Органик Страна происхождения : Иран    Этот высококачествен
20 Апреля 2022
Описание продукции
PEONY ROOT EXTRACT BG
19 Августа 2021
Описание продукции
Уме экстракт ( Ume extract (B)-BG )
19 Августа 2021
Все статьи